Avantages et précautions du tampon TRIS

Les agents tampons biologiques sont d'une grande importance dans la recherche biochimique. Ils sont largement utilisés dans l'immunoblotting, la biopuce et l'hybridation biologique, le diagnostic in vitro, la biomédecine et d'autres industries.

Le système de biotampon contient des dizaines de variétés. Variétés typiques telles que Tris, HEPES, etc. Cet article présentera la variété la plus courante des avantages du tampon Tris et des questions d'utilisation nécessitant une attention particulière.

. Introduction:

Tris trométhamineEst une sorte de sel tampon largement utilisé dans le domaine biomédical, le nom complet du trIS (hydroxyméthyl) aminométhane, formule chimique C4H11NO3, particule cristalline blanche, CAS No. : 77-81-1, 25 ° C pKa 8.06, souvent utilisé dans le tampon protéique ou d'acide nucléique, la plage effective est généralement entre pH 7.0 et 9.2.

Tris est utilisé pour faire pousser des cristaux de protéines dans différentes conditions de pH. Tris est également l'un des principaux composants du tampon d'électrophorèse des protéines. Il forme un système tampon avec de la glycine dans un tampon d'électrophorèse pour stabiliser le pH pendant l'électrophorèse. De plus, Tris est un intermédiaire dans la préparation des tensioactifs, des promoteurs de vulcanisation et de certains médicaments. Tris est également utilisé comme norme de titrage.

Les tampons Tris communs sont le tampon Tris-HCl, le tampon TRis-phosphate et une variété de tampons dérivés, tels que TBS, TE, etc.

Ⅱ. Les avantages du tampon Tris sont les suivants:

1. Tris alcali est fort, de sorte que vous ne pouvez utiliser ce système tampon pour préparer une large gamme de tampon pH de l'acide à alcalin, un large éventail d'applications;

2. le tampon Tris a peu d'interférence sur le processus biochimique et ne précipite pas avec le calcium, le magnésium et les ions de métaux lourds;

3. Tris a une solubilité élevée dans l'eau et est inerte à de nombreuses enzymes;

4. Haute capacité de mise en mémoire tampon de Tris, forte capacité tampon entre pH7.5-9.0;

5. le tampon Tris est largement utilisé et joue un rôle important dans la biochimie, la biologie moléculaire, le diagnostic in vitro, les cosmétiques, les revêtements et d'autres domaines.

Ⅲ. Précautions pour l'utilisation du tampon Tris:

1. La valeur du pH du tampon Tris est grandement affectée par la température, la pKa / ℃ = -0.031, par exemple: tampon 4 ℃ pH = 8.4, 37 ℃ pH = 7.4, doit donc être préparé à l'utilisation de la température, la préparation à température ambiante du tampon TRIS-HCl ne peut pas être utilisée pour 0 ℃ ~ 4 ℃.

2. la valeur du pH du tampon Tris est fortement affectée par la concentration de la solution. Lorsque le tampon est dilué dix fois, le changement de valeur du pH est supérieur à 0.1

3. Tris réagit avec diverses molécules dans une certaine mesure, y compris les inhibiteurs de RNase, les aldéhydes, les enzymes, l'ADN et les métaux communs tels que Cr3 , Fe3 , Ni2 , Co2 et Cu2 , etc., qui peut jouer un rôle inhibiteur dans certains systèmes. L'interaction avec d'autres composants doit être prise en compte dans le processus de préparation.

4. tampon Tris est facile à absorber CO2 dans l'air, et le tampon préparé doit être hermétiquement scellé;

5. le tampon Tris a un certain effet d'interférence sur certaines électrodes de pH, il est donc nécessaire d'utiliser des électrodes compatibles avec la solution Tris;

6. le tampon Tris ne convient pas à la détermination de l'acide diquinolinique (BCA);

7. L'inhalation, l'ingestion et l'absorption cutanée de Tris peuvent causer des blessures. Porter des gants et des lunettes lors de l'utilisation;

8. Lorsqu'il est utilisé comme tampon protéique, si la spectrométrie de masse est nécessaire pour les travaux ultérieurs, Tris ne convient pas et il est préférable de passer à un autre tampon qui peut être toléré par le spectromètre de masse.

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