De nombreuses méthodes de phase liquide servent de sels tampons. Il a été constaté que beaucoup de gens ne comprennent pas l'application des sels tampons dans les méthodes en phase liquide, je voudrais donc partager certains de mes points de vue et stimuler la discussion.
Si l'échantillon ou les impuretés clés à étudier dans l'échantillon ont des tendances à l'ionisation, d'autres cas spécifiques seront discutés séparément. Parmi les composants à fortes tendances à l'ionisation, certains sont à l'état moléculaire et se combinent mieux avec la phase stationnaire chromatographique en phase inverse; d'autres sont à l'état ionique et ont une affinité plus forte pour la phase mobile. Si l'état d'ionisation de l'état de la molécule et de l'état ionique n'est pas contrôlé en utilisant des sels tampons, il est facile d'avoir un pic de queue et de bifurcation. Dans ce cas, l'eau et les systèmes organiques ne doivent pas être utilisés comme phase mobile, et les sels tampons et les systèmes organiques doivent être sélectionnés.
Lors de l'utilisationSels d'électrolyte tamponnésDans la phase mobile, il devrait avoir une certaine capacité de mise en mémoire tampon. Si la réduction de la quantité d'injection de l'échantillon peut améliorer la forme du pic, cela peut indiquer que la capacité tampon de la solution saline tampon est insuffisante. La capacité tampon de la solution saline tampon est liée à la concentration du sel tampon et à la valeur du pH de la solution saline tampon. Plus la concentration du sel tampon est élevée, plus la capacité de mise en mémoire tampon est forte; plus la valeur du pH de la solution saline tampon est proche de son pKa, plus la capacité de mise en mémoire tampon est forte. Généralement, la valeur du pH de la solution saline tampon doit être dans la plage de pKa ± 1. Afin d'assurer que le temps de rétention de la principale Le composant ne s'écarte pas beaucoup en raison de légers changements de valeur du pH, la valeur du pH de la solution de sel tampon doit être en dehors de la plage de l'échantillon pKa ± 2.
Chaque sel tampon a une longueur d'onde de coupure correspondante et la longueur d'onde de détection du procédé ne doit pas être inférieure à la longueur d'onde de coupure de la solution de sel tampon. Plus la longueur d'onde de détection est proche de la longueur d'onde de coupure de la phase mobile, plus le bruit de base est élevé, plus l'erreur de valeur de réponse est grande et plus la valeur de réponse et la sensibilité du composant sont petites.
1. la concentration de sel tampon est généralement 10-50 mmol/L. La concentration du sel tampon doit être sélectionnée en fonction des propriétés de l'échantillon et de la quantité d'injection pour atteindre la capacité tampon requise.
2. La proportion maximale admissible de la phase organique dans l'élution du gradient doit être déterminée en mélangeant des expériences de sels tampons et de phases organiques. Différentes proportions de sel tampon-phase organique doivent être prises pour déterminer la proportion maximale admissible de la phase organique, telle que 10:90, 20:80, 30:70, etc. Les sels tampons ne doivent pas être fixés à une proportion élevée sur l'instrument pour empêcher la précipitation de sels tampons d'endommager l'instrument.
3. Choisissez des sels tampons en fonction de plusieurs contraintes telles que la longueur d'onde de coupure, la valeur du pH et la capacité tampon, etc. Par exemple, si la longueur d'onde de détection est à l'absorption finale, le phosphate doit généralement être sélectionné.
4. Les solutions de sel de Commonbuffer comprennent: 0.1% d'acide phosphorique/acide trifluoroacétique/solution d'acide acétique/d'acide formique, 0.02-0. Solution de dihydrogénophosphate de potassium 05mol/L (ajustée au pH 3.0 avec de l'acide phosphorique), etc.
5. pour les composés alcalins, les sels de potassium sont préférés, ce qui peut mieux supprimer l'effet de queue.
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